四川大学学报(医学版)

2017, v.48(05) 727-731

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IGF-1R对甲状腺相关眼病眼眶成纤维细胞合成HA的影响及其作用机制
Effects and Its Mechanism of IGF-1R on the Synthesis of Hyaluronic Acid in Orbital Fibroblasts of Thyroid Associated Ophthalmopathy

陈小玲;何为民;李薇;

摘要(Abstract):

目的探讨胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)对甲状腺相关眼病(TAO)眼眶成纤维细胞合成透明质酸(HA)的影响及其作用的信号通路。方法体外培养19例(23只眼)TAO患者(TAO组)及5例(5只眼)正常对照(对照组)眼眶成纤维细胞,并采用免疫荧光染色进行鉴定;细胞培养液中分别加入不同浓度重组人IGF-1,ELISA检测细胞培养上清液中HA质量浓度;细胞培养液中分别加入IGF-1受体阻断剂1H7、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)阻断剂LY294002或蛋白激酶B(PKB)抑制剂(即Akt抑制剂)Ⅳ对细胞进行预处理,再加入重组人IGF-1,ELISA检测培养上清液中HA质量浓度,Western blot检测PI3K、Akt及p-Akt蛋白表达情况。结果TAO组HA质量浓度在重组人IGF-1 0~5nmol/L处理时逐渐增加,在IGF-1 10nmol/L时达到最大值,随后在IGF-120~50nmol/L时出现波动。与正常对照组相比,0~50nmol/L重组人IGF-1处理的TAO组HA质量浓度均增高,差异有统计学意义(P<0.01)。IGF-1受体阻断剂1H7和Akt抑制剂Ⅳ对细胞预处理后,再加入重组人IGF-1,其细胞培养上清液中的HA质量浓度较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.01),PI3K阻断剂LY294002预处理后,细胞培养上清液中HA质量浓度约有降低,但差异无统计学意义(P=0.390)。与空白对照组相比,IGF-1处理组细胞p-Akt蛋白表达水平升高,而对PI3K和总Akt蛋白表达无明显影响;1H7和LY294002可降低PI3K及p-Akt蛋白的表达水平,对总Akt蛋白表达的抑制作用不明显;Akt抑制剂Ⅳ处理组,PI3K、Akt及p-Akt蛋白表达水平均较对照组明显降低。结论 TAO患者眼眶成纤维细胞合成HA增加,IGF-1能促进HA合成,且这种促进作用部分通过PI3K/Akt信号通路实现。

关键词(KeyWords): 甲状腺相关眼病;;透明质酸;;胰岛素样生长因子受体;;信号通路

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 四川省科技计划项目(No.2013SZ0029);; 成都市科技惠民项目(No.2014-HM01-00142-SF)资助

作者(Author): 陈小玲;何为民;李薇;

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